Ciklinė peptidų sintezė - Mokslinis peptidas

Ciklinė peptidų sintezė|Individualūs cikliniai peptidai|Susegti peptidai|Šoninės grandinės ciklas|Mokslas{0}}Peptidas

Meta aprašymas

Reikia sudėtingų ciklinių peptidų? Mokslas-Peptido ciklinės peptidų sintezės paslauga apima pirmą ir paskutinę ciklizaciją, šoninės grandinės ciklizavimą, susegtą peptidą, kelių disulfidinių jungčių susiejimą. 20 metų patirtį kuriant sudėtingus ciklinius peptidus, stabilų pristatymą. Nedvejodami susisiekite su mumis.

Ciklinis peptidas: atnaujinta linijinio peptido versija

Kodėl cikliniai peptidai?
Kiekvienas, kuris dirbo su peptidais, žino, kad linijiniai peptidai veikia gerai, tačiau kartais jie neveikia taip gerai -, per trumpą laiką patekę į organizmą juos suskaido fermentai arba jie nepakankamai tvirtai prisijungia prie tikslinės vietos. Linijinių peptidų pavertimas kilpomis yra tiesiausias būdas išspręsti šias problemas.

Cikliniai peptidai turi fiksuotą konformaciją ir juos nelengva pjaustyti proteazėmis; kai jie sujungiami su taikiniu, nes struktūra buvo užrakinta, entropijos praradimas yra mažas, o rišamoji jėga yra stipresnė. Daugelis natūralių aktyvių peptidų yra ciklinio pobūdžio, pavyzdžiui, antibakteriniai peptidai ir imunosupresantai, kuriems evoliucija jau seniai pasirinko kryptį.

Tačiau ciklinių peptidų sintezės sudėtingumas iš tikrųjų yra daug didesnis nei linijinių peptidų. Mes jau anksčiau užlipome ant šių duobių ir žinome, kaip jas apeiti, pvz., mažas žiedo susidarymo efektyvumas, daugybė šalutinių reakcijų ir negalėjimas atkurti valymo.

Ką galime padaryti dėl skambėjimo?

1. Circularization: priklausomai nuo to, ko norite

Dviračio tipas	Kaip	Kada jį naudoti
Pirmas ir paskutinis žiedavimas	N-end ir C-end yra tiesiogiai sujungti	Imituojant natūralius ciklinius peptidus, dažniausiai naudojami trumpi peptidai
šoninės{0}}grandinės ciklas	ciklizacija per Lys, Glu ir Asp šonines grandines	Norite palikti galą apdailai, arba žiedas yra didesnis
disulfidinių jungčių ciklizacija	Disulfidinės jungties susidarymas tarp Cys	Antimikrobiniai peptidai, toksinų peptidai, dažniausiai pasitaikantys natūraliai
Susegti peptidai	Angliavandenilių grandinė prisega spiralę	Alfa{0}}spiralės stabilizavimas ir membranos įsiskverbimo pagerinimas
Sieros eterio ciklizacija	Ne{0}}natūralus jungimasis, atsparesnis fermentiniam skaidymui	Kad jis būtų pagamintas į vaistą, reikalingas didelis metabolinis stabilumas

Atsižvelgdami į jūsų tikslinę struktūrą, nustatysime, kuris ciklas yra tinkamiausias. Pirmasis ciklinių peptidų sintezės žingsnis yra pasirinkti tinkamą ciklizacijos metodą.

2. Disulfidiniai ryšiai: sudarytos nuo vienos iki keturių porų
Vienos poros disulfidinė jungtis: įprasta operacija, sėkmės rodiklis viršija 95%.
Dvi disulfidinių jungčių poros: reikia kontroliuoti poravimo tvarką, turime stačiakampės apsaugos strategiją.
Trys ar daugiau porų: iki keturių porų, atidarytų ir suderintų po vieną.

3. Ilgis: 2-60 aminorūgščių po ciklizacijos
Kuo ilgesnis ciklinis peptidas, tuo geriau, tuo ilgiau sumažės ciklizacijos efektyvumas. Ilgiausias ciklinis peptidas, kurį kada nors sukūrėme, yra 60 aminorūgščių, ir mes pirmiausia susintetinome linijinį fragmentą segmentais, o tada ciklizavome jį skystoje fazėje.

4. Grynumas: priklausomai nuo eksperimento etapo

Grynumo lygis	Tinkami scenarijai
žalias (70–85 %)	Pradinis patikrinimas, pirmiausia patikrinkite, ar jis aktyvus, sutaupykite pinigų
Įprastas grynas (85-95%)	Ląstelių eksperimentai, kartu su eksperimentais, kurie
Didelis grynumas (95-98%)	Eksperimentai su gyvūnais, funkcinis patvirtinimas
Ultrapure (>98%)	Kristalų struktūra, BMR

Prie kiekvieno ciklinio peptido pridedamos HPLC ir MS ataskaitos, o ciklizacijos efektyvumas, likutinis linijinis peptidas ir grynumas yra aiškiai pažymėti.

5. Žiedą taip pat galima modifikuoti
Fluorescencinis ženklinimas: FITC, TAMRA, Cy5, nori pamatyti, kur eina ciklinis peptidas.
Biotinas: patraukite{0}}žemyn arba išbandykite.
PEGilinimas: pusinės -in vivo trukmės pailgėjimas.
D- tipo aminorūgštys: pagerina stabilumą.

Kodėl verta atvykti pas mus dėl ciklinės peptidų sintezės?

1. Šį darbą dirbame 20 metų
Ciklinė peptidų sintezė yra ne tik linijinio peptido įmetimas į reakcijos buteliuką ir maišymas. Jei ciklizacijos sąlygos šiek tiek prastos, arba derlius bus toks mažas, kad suabejote savo gyvybe, arba bus daug šalutinių -produktų, kurių negalima atskirti.

Transmembraninių peptidų ciklizavimas, konotoksinas su trimis disulfidinių jungčių poromis, susegti spiraliniai peptidai - per daugelį metų tvarkėme daug sudėtingų ciklizacijos peptidų. Puikiai žinome, kurias sekas lengva polimerizuoti ir kokiomis sąlygomis jas galima išsaugoti. Jei atvyksite pas mus dėl ciklinės peptidų sintezės, bent jau jums nereikės žengti į duobę nuo pat pradžių.

2. Ciklizacijos strategijos: kietos fazės arba skystos fazės, pasirinkimas yra jūsų
Kietosios fazės{0}}ciklizavimas: tiesioginis žiedo formavimas ant dervos, tinka trumpiems peptidams ir šoninės grandinės ciklizavimui, lengvas valdymas, tinkamas dideliam pralaidumui.
Skystosios fazės ciklizavimas: linijinių peptidų gryninimas, po kurio ciklizuojamas, tinka ilgiems peptidams arba kai reikalingos praskiestos sąlygos, kad būtų išvengta polimerizacijos.
Dviejų{0}}pakopų metodas: linijinio peptido kietosios
Nėra vieno-dydžio-visiems-tinkamo požiūrio. Parinksime patikimiausią maršrutą pagal jūsų seką ir važiavimo dviračiu metodą.

3. Disulfidinio ryšio atitikimas: jokių spėlionių, jokios strategijos
Sunkiausias dalykas, susijęs su keliomis disulfidinių jungčių poromis, yra poravimo tvarka. Turime stačiakampės apsaugos strategiją, kuri gali jas atidaryti ir suporuoti po vieną, kad būtų užtikrinta, jog disulfidinės jungtys būtų sujungtos reikiamoje vietoje.

4. Kokybės kontrolė: kiekvienas ciklinis peptidas yra dokumentuojamas
MS: Pirmiausia pažiūrėkite, ar molekulinė masė yra teisinga (18 ar daugiau mažesnė nei tiesinė po ciklizacijos, priklausomai nuo žiedo formavimo metodo).
HPLC: pažiūrėkite į grynumą, taip pat pažiūrėkite, kiek linijinių peptidų nėra kilpų.
Neprivaloma: peptidų kiekis, endotoksinas, drėgmė.
Atliekant ciklinę peptidų sintezę, duomenys kalba patys už save, nėra melo.

5. Nuo mažų iki didelių kiekių, nekeičiant tiekėjų
Miligramai atrankos fazėje, dešimt miligramų patvirtinimo fazėje, šimtas miligramų iki gramų ikiklinikinėje fazėje - galime padaryti viską. Tas pats projektas, tas pats atitikmuo, nereikia iš naujo-derinti.

Kam gali būti naudojami cikliniai peptidai?

Tyrimo kryptys	Bendras naudojimas	Ciklizacijos metodas
Antimikrobiniai peptidai	Geresnis stabilumas, mažiau jautrus fermentiniam skilimui	disulfidinės jungties ciklizacija, ciklizacija nuo galvos{0}}į-uodegą
Priešnavikiniai peptidai	Patobulintas susiejimas su tikslu	susegti peptidai, šoninės grandinės ciklizacija
imunosupresija	ciklosporino analogai	Pirmas ir paskutinis žiedavimas
į ląsteles- prasiskverbiančius peptidus	Pagerinti gebėjimą patekti į ląsteles, kurios	Susegti peptidai
toksinų tyrimai	Konotoksinas, gyvatės nuodų peptidai	Kelios disulfidinių jungčių poros
peptidiniai hormonai	pailgėjęs pusinės -pusėjimo laikas	šoninės{0}}grandinės ciklas
diagnostiniai reagentai	Žiedinis zondas, geras specifiškumas	gali būti paženklinti biotinu arba fluorescenciniais žymenimis

Pristatymas ir kokybės kontrolė

Pristatymas: Liofilizuoti milteliai, centrifuginiai mėgintuvėliai arba buteliukai, apsaugoti azotu.
Pridedami dokumentai: COA (HPLC profilis + MS spektras), MS/MS (siekiant patvirtinti ciklizacijos vietos / disulfidinės jungties porą).
Neprivalomi tyrimai: peptidų kiekis, endotoksinas, drėgmė, aminorūgščių sudėtis.
Individualizuota pakuotė: dalijimas ir žymėjimas pagal jūsų poreikius.
Kiekvienas ciklinių peptidų sintezės produktas yra du kartus{0}}patikrinamas, kad būtų užtikrintas teisingas cikliškumas ir grynumas prieš išsiunčiant.

Trys tikros istorijos

1 atvejis: mokslinių tyrimų instituto antimikrobinių peptidų programa

The client wanted a cyclic peptide containing two pairs of disulfide bonds, 28 amino acids, of natural origin. We designed an orthogonal protection strategy, forming the first pair first, then oxidizing to form the second pair. Finally, the purity of the cyclic peptide is >95%, disulfidiniai ryšiai yra tinkamai suporuoti, o aktyvumas patikrintas.

2 atvejis: daugianacionalinės farmacijos įmonės susegtų peptidų projektas

The customer wanted a stapled peptide with stabilized α-helix and 22 amino acids. We introduced olefinic amino acids into the solid-phase synthesis and completed the ring closure on the resin. The purity was >90%, o spiralė buvo 40% didesnė nei linijinio peptido, o peptidas buvo sėkmingai įtrauktas į eksperimentus su gyvūnais.

3 atvejis: toksinų tyrimas nacionaliniame universitete

Klientas norėjo pagaminti Conotoxin, kuriame būtų trys poros disulfidinių jungčių, ir paprašė kelių įmonių tai padaryti. Mes pertvarkėme apsaugos strategiją, atidarėme ir suporavome disulfidines jungtis trimis etapais ir patvirtinome, kad MS / MS teisingai susiejo. Klientui gavus peptidą, išsprendėme struktūrą ir paskelbėme straipsnį.

Kalbate apie savo ciklinių peptidų poreikius?

Nesvarbu, ar norite sudėtingo ciklinio peptido kritiniams eksperimentams, ar norite ciklizuoti linijinį peptidą, kad pagerintumėte vaisto tinkamumą, galite pasikalbėti su mumis. Jei ieškote mokslo{1}}peptidų, skirtų ciklinei peptidų sintezei, bent jau jums nereikia žengti į duobę nuo pat pradžių.

Man reikia, kad tu man pasakytum:

Peptidų sekos (arba tiesinės sekos)
Kaip norite ciklizuoti (pirma ir paskutinė / šoninė grandinė / disulfidinė jungtis / susegtas peptidas)
Kiek prašyti (mg/g)
grynumo reikalavimai

Kada to nori?

Pateikite galimybių įvertinimą ir pasiūlymą per 24 valandas.